Ocena porównywalności oznaczeń obecności antygenów Fim2 i Fim3 Bordetella pertussis metodą serotypowania
[Reproducibility of Fim2 and Fim3 antigens determination in Bordetella pertussis by serotyping method]

Streszczenie

W pracy poddano ocenie wiarygodność wyników serotypowania izolatów Bordetella pertussis metodą aglutynacji na mikropłytkach z użyciem przeciwciał monoklonalnych otrzymanych w trzech laboratoriach. Brak pełnej zgodności wyników serotypowania może być związany z rodzajem stosowanych podłoży, subiektywnym odczytem wyników, różnicami warunków hodowli lub niewystarczającą swoistością przeciwciał. Dalsza standaryzacja zaleceń serotypowania powinna uwzględnić typ podłoża oraz warunki hodowli, co może wpłynąć na poprawę porównywalności wyników badań międzylaboratoryjnych.

Abstract

Introduction: Serotyping is a commonly used method to characterize the presence of Fimbriae 2 and 3 in Bordetella pertussis strains for epidemiological purposes and optimal choice of strain composition of the pertussis whole-cell vaccine. Monoclonal antisera against Fim2 and Fim3 are recommended to be used for microplate serotyping instead of polyclonal. Reliable evaluation of fimbriae expressed by B. pertussis strains influence interpretation of vaccine-driven strain evolution.Methods: To evaluate the impact of tests conditions on the reproducibility of serotyping, results of serotyping based on a standardized protocol for microplate agglutination with monoclonal antisera performed in three different accredited laboratories were compared. For the study isolates of three vaccine strains of B. pertussis deposited within seed lot system originating from different liofilization lots were compared. Results: Lack of the complete agreement on serotyping results among three labs might relates to the differences of media used, subjective reading, test conditions, and specificity of the reagents.Conclusions: Serotyping results should be interpreted with caution and the type of media and culture conditions used should be precisely recommended after validation studies. Inconsistent results should be confirmed using an alternative technique, eg. ELISA or by reference laboratory.