PDF

Medycyna Doświadczalna i Mikrobiologia 2013, 65(2): 111-118

Zastosowanie metod molekularnych w diagnostyce zakażeń Clostridium difficile
[The use of molecular methods in the diagnosis of Clostridium difficile infections]

G. Dulny, G. Nurzyńska, S. Walter de Walthoffen, A. Kraśnicka, G. Młynarczyk

Streszczenie

Założeniem niniejszej pracy było zastosowanie metod molekularnych do szczegółowej identyfikacji wybranych szczepów C. difficile uzyskanych od pacjentów hospitalizowanych w latach 2008 i 2011 w SP CSK w celu potwierdzenia ich toksynotwórczości oraz określenia cech epidemicznych, w tym występowania przypuszczalnego szczepu C. difficile 027/NAP1/B1. Materiałem pierwotnie podlegającym badaniu był świeżo pobrany kał od pacjentów, u których wystąpiła biegunka. Próbki kału były badane na obecność toksyn A i B metodą immunoenzymatyczną oraz na obecność C. difficile metodą posiewu. Szczepy po ich wyizolowaniu przechowywano na podłożach MICROBANK, w temperaturze -700C. Z tak przygotowanej kolekcji, do badań molekularnych wybrano 48 szczepów wyizolowanych w 2008 roku oraz 28 szczepów wyizolowanych w 2011. Wśród izolatów C. difficile poddanych badaniom molekularnym stwierdzono 6 szczepów 027/NAP1/BI wśród 48 badanych szczepów wyizolowanych w 2008 roku co stanowiło 12,5% oraz 24 szczepy 027/NAP1/BI wśród 28 szczepów wyizolowanych w 2011 roku co stanowiło 85,7%. Wykrycie występowania hiperepidemicznego szczepu C. difficile jest kluczowe dla podejmowania działań przeciwepidemicznych w placówkach służby zdrowia, w których te zachorowania występują coraz częściej i są odpowiedzialne za ogniska szpitalne

Abstract

Introduction: The aim of this study was to use molecular methods to identify selected strains of C. difficile isolated from patients hospitalized at Independent Public Central Teaching Hospital [SP CSK] between 2008 and 2011 in order to demonstrate their toxigenic character and to determine their epidemic potential, including the incidence of a suspected C.strain 027/NAP1/B1. Material and methods: Originally evaluated material consisted of freshly collected stool samples from patients who had developed diarrhea. Stool samples were assessed for toxins A and B via an immunoenzymatic method and for the presence of C. difficile via the first culture method. The isolated strains were stored on MICROBANK mediums, at –700C. From this sample collection, 48 strains isolated in 2008 and 28 strains isolated in 2011 were selected for molecular analyses. Results: Among the C.isolates that underwent molecular analyses there were 6 strains 027/NAP1/BI out of the 48 evaluated strains isolated in 2008, which constituted 12,5% and 24 strains 027/NAP1/BI out of the 28 strains isolated in 2011, which constituted 85,7%. Conclusions: Identification of a possible hyperepidemic strain of C. difficile is crucial for undertaking any anti-epidemic activities in health care facilities, where such activities are more and more common and are responsible for nosocomial foci of infection.

Liczba pobrań: 2036