Metody badania potencjalnych inhibitorów wirusa zapalenia wątroby typu C w linii komórkowej Huh-7.5
[Methods of testing potential inhibitors of hepatitis C in Huh-7.5 cell line]

Streszczenie

Zgodnie z szacunkami Światowej Organizacji Zdrowia z powodu chorób wątroby wywołanych wirusem HCV umiera rocznie 350 000 osób. Dotychczas nie udało się stworzyć skutecznej szczepionki przeciwko wirusowi HCV, a dostępne obecnie terapie nie dają 100% pewności wyleczenia. Dlatego od wielu lat na całym świecie prowadzone są intensywne badania nad poszukiwaniem
nowych leków o bezpośrednim działaniu przeciwwirusowym. Celem pracy było opracowanie metodyki badania aktywności oraz cytotoksyczności potencjalnych inhibitorów helikazy HCV w systemie produkującym wirusowe cząstki potomne.

Abstract

Introduction: According to WHO reports, there are 130-170 million persons chronically infected with hepatitis C virus on a global scale. There is no effective vaccine against HCV, and the current standard of chronic hepatitis C therapy has limited efficiency and undesirable side effects. Current studies are focused on searching for a new therapeutic agents, which are specifically
targeted against the virus. The aim of the study was to develop a methodology for testing the activity and cytotoxicity of potential helicase inhibitors (derivatives of anthracycline antibiotics) in Huh-7.5 cell line infected with HCV.Methods: The Huh-7.5 cell line was infected with the JFH1 (Japanese Fulminant Hepatitis) RNA by lipofection. The cytotoxicity of anthracycline antibiotics was measured by Cell Proliferation Kit II (XTT), after 1, 2, 3, 4 and 24 hours after incubation with tetrazolium salt XTT. The activity of anthracycline antibiotics was examined by Real-Time PCR method. Results: The study allowed to optimize the conditions of cytotoxicity and activity studies of anthracycline antibiotics. Conclusions: Huh-7.5 cell line infected with HCV is a robust cell culture model for screening new antivirals against HCV.